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檸檬酸鉛常用于電子顯微鏡的試劑,對于生物樣品的超薄切片來說,圖像反差來源樣品對于電子束的散射能力,而其散射能力取決于原子組成:原子序數(shù)越高,電子密度越高,散射電子能力越強(qiáng),電鏡下顯黑色;原子序數(shù)越低,電子密度越低,散射電子能力越弱,電鏡下顯示白色。而生物樣品主要由C、H、O、N、P、S等低原子序數(shù)的元素組成,未經(jīng)染色的超薄切片,反差很弱,特別是用于醫(yī)學(xué)診斷的切片,反差效果差會導(dǎo)致結(jié)構(gòu)不清晰,嚴(yán)重影響病理醫(yī)生的診斷結(jié)果。
目前常用的超薄切片染色液包括醋酸雙氧鈾染色液和檸檬酸鉛染色液。其中,醋酸雙氧鈾:也稱醋酸雙氧鈾,它以提高核酸、蛋白質(zhì)和結(jié)締組織纖維的反差為主,對膜染色效果較差。檸檬酸鉛:密度大,對各種組織結(jié)構(gòu)都有廣泛的親和作用,尤以提高細(xì)胞膜系統(tǒng)及脂類物質(zhì)的反差為好,對不能被鋨酸染色的糖原更具有染色作用。由于鈾和鉛具有不同的染色特征,所以目前切片普遍都采用雙重染色。即先用醋酸雙氧鈾染色后,再用檸檬酸鉛染色,相互補(bǔ)充,從而獲得較佳的染色效果。