電鏡超薄切片檸檬酸鉛染色保存方法

天元航材化工原料廠家的小編今天給大家介紹下關于電鏡超薄切片檸檬酸鉛染色保存方法的相關介紹，超薄切片用于電子顯微鏡觀察。由于電子穿透組織的能力較低，用于電鏡的切片要求極薄（一般為40～50nm厚），稱為超薄切片。隨著電子顯微鏡在生物醫(yī)學研究中的廣泛應用，對觀察樣品制備條件的要求也越來越嚴格。由于Watson(1958)首先提出鉛化合物可以增加超薄切片細胞超微結構的對比度，因此Reynolds(1963)介紹的檸檬酸鉛在國內外多被用作常規(guī)的鉛染料。然而，多年來，超薄切片的鉛污染一直是許多實驗室的普遍問題。電子顯微鏡的超薄切片通常用醋酸鈾和檸檬酸鉛染色。由于液態(tài)鉛與空氣中的二氧化碳接觸，染色常會產生細小的碳酸鉛（黑色）沉淀，直接影響超微結構的觀察，導致染色失敗。而且鉛溶液不能長期存放，否則污染會更嚴重。
檸檬酸鉛：密度高，對多種組織結構有廣泛的親和作用，特別是對改善細胞質系統(tǒng)軟件和長鏈脂肪酸化學品之間的差距，糖原不能用鋨酸染色效果染色。由于鈾和鉛具有不同的染色特性，目前切片切割廣泛采用雙向染色。即先用二氧化鈾冰醋酸染料，再用檸檬酸鉛染色劑相互填充，得到染色劑的最佳實際效果。
那么我們該如何對電鏡超薄切片染色液檸檬酸鉛保存的改進以下呢
檸檬酸鉛的污染是電子顯微鏡下超薄切片染色中最令人不安的事情。由于檸檬酸鉛染料堿度高（pH值在12.0左右），在空氣中很容易與二氧化碳一起沉淀出碳酸鉛。由于沉淀，鉛顆粒出現在標本上，鉛顆粒覆蓋了標本的組織結構。它也與細胞顆粒成分混淆。因此，為獲得滿意的染色效果，檸檬酸鉛染料在儲存和使用過程中應盡量減少與空氣的接觸。檸檬酸鉛染料現在通常儲存在溶液瓶中，在染色過程中用移液管吸出。
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